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排列5胆拖投注金钱:银杏叶提取物中黄酮类成分的高效液相色谱分析_图文

彩票排列5预测号码推荐 www.brcqt.tw 银杏叶提取物中黄酮类成分的 高效液相色谱分析
谢大年 郭兆贵
长沙 407 ) 108

( 湖南 医科大学 临床药理国家培训中心

1 前言 银杏叶提取物(x a Gng boa E b作 Etc i o  b, G ) r t?。?i l
为治疗应用 已有几个世纪 , 在德国和法 国已成为 医 生最???的处方 药品之一 我国早在 7 年 代虽有 0

流 动相 : 甲醇- 4 0 %磷酸溶液 (5 4 , 速: . 5 :5 流

10 Lmn柱温:5 进样体积:0L检测波长: .m /i; 2℃ 妫, 1 ,
30 m。 6n

E b制剂面市, G 但缺乏适当的质量控制方法, 产品
质 量不稳定 , 了该 产品在临床上的应用。E b 影响 G 中含有黄酮甙、 银杏 内 酯和一些酚性酸。 国内多采用 比 色法[测定 E b ] G 所含银 杏总黄酮作为含量标准 ,

24 样品制备 . ?。埃保?b加2m .gG , 0L甲醇使其完全溶解, 然后 加入 15 o L的盐酸溶液 2m .m l / 0 L混匀, 置水浴上
回流加热 10 2 分钟 , 冷却, 用甲醇定量转入 5m 0 L的

容量瓶并稀释至刻度, A . 用F 05m滤膜过滤。

该法重现性较差。 国外采用样品直接进样, 梯度洗脱 高效液相色谱分析, 测定其所含黄酮甙类成分[, 2 ;
或样品经酸水解后, 梯度洗脱高效液相色谱分 析, 测

3 结果与讨论
31 流动性的选择及P 值对色谱分离的影响 .
E b经酸水解后 , G 含有三 种主要黄酮 甙元 , 以

定水解甙元含量[]也有用高效液相色谱法测定 4 , 5 E b中银杏内 G 酯含量的报道[。由 ] 6 于梯度洗脱常引
起 基线漂 移 , 定量 分析 带来 困难。我们 研究 了 给 E b经酸水解 , G 等度洗 脱高效液相 色谱分析 , 解 水 后的三种主要黄酮甙 元槲 皮素、 山萘素和异鼠李素 获得满意的分离 。方法简便 , 重现性好 , 准确度高 。

甲醇- 5 4 水(5:5为流动相, 三种成分可获得满意分
离。由于黄酮甙元的酚羟基易于 电离 , 组分峰拖尾,

加入磷酸调整流动相p H为25组分峰的对称性良 .,
好, 图见 图 1 乙腈或四氢呋喃有机改性 剂不能 色谱 。 改善山萘素和 异鼠李素的分离效果 。

2 实验部分
21 试剂 与样品 . 重 蒸 水 ( 制, l oe  0 4 自 Mipr H . 5m 滤 膜 过 l i A

滤)甲醇(R Mii rF 05m , G , , A , l oe  . )磷酸(R 槲 l p A
皮素对 照 品( 中国药 品生 物制 品检定所 提供,8- 01

90 03溶解于甲醇中, 配制成00m / L用前新鲜 .6 gm ,
配制。 G 湖南麓山天然植物制药有限公 司提供) Eb 。 22 仪器 .

美国光谱物理公司高效液相色谱仪S80 泵, P80
S 40 40 型积分仪 ,ho D 脱气机, ei R -8 Cr m  e Shr 5  1 - P

32 色谱峰归属及峰纯度检查 .
以槲皮素对照 品确定槲 皮素峰位 , 柱后收集另 两种洗脱组分 , 氮气挥散溶剂 , 分别以 甲醇和氢氧化 钠的甲醇溶液溶解 , 测定紫外吸收光谱 , 与文献[图 ] 7 谱 比较确定山萘素和异鼠李素的峰位 。以吸收度比

( ) 5m 色谱柱(2m 20 m×46 m , .m 进样器配1 0L定 量管。Wa rM40 ts?。箍杀喑绦蜃贤饧觳馄?。 e 23 色谱条件 .

本文收稿 日期:93 1 1 日, 19 年 0月 0 修回日期:93 1 月 2 19 年 2 1日

值法(6n /5n 检测 , 明 皮素、 30m 24m 证 槲 山萘素和异 鼠李素峰均为纯组分 。

品银 杏总黄 酮含量 分别为 2.%,54 2.% 22 2.%,14

和2.%。 G 含有2 多种黄酮类成分, 54 E b 0 测定每一
种黄酮成分的含量十分复杂 。但这些成分的甙元部 分为槲皮素 、 山萘素和异 鼠李素 , 经酸水解后高效液 相色谱分析也可发现主要为上述 3 种黄酮甙元。我 们采用等度洗脱法 , 简化分析条件 , 提高了测定的准 确度 , 种快速可行 的方法 。本法的建立对控 制 是一 Eb G 质量, 提高临床疗效具有实际意义。
关键词 高效液相色谱 , 黄酮类化合物, 槲皮 素, 杏 银
叶提 取物

33 样品稳定性 .
槲皮素对照 品和水解后的样品溶液放置过夜 , 含量降低较大, 所以样品和对照品应新鲜制备 。

34 线性关系 . 外标峰面积法测定, 槲皮素在001 . 范 .0~02g
围 内呈 良好 的线 性关 系 , Y=1. 85X- 21, = .2γ

099。 .98 X单位为gY , 为积分峰面积。 35 加样回收率与重现性试验 . ?。埃?G , .gE b精确称定, 加入槲皮素对照品 2g按样品制备中的方法, m, 测得槲皮素的添加回收
率见表 1 对照品测定精密度 C =22 n ) 。 V . %(=5, 样 品测定精密度 C =30 n ) V .%(=4。
表 1 槲皮素加样回收率试验









1 庄向 虞杏 杨 平, 英, 更生等. 草药, 9; () 2 中 1 22 3: 2 9 3 1
2  i t P Pe a  t ,MarP rn A  a u ,Buo  e l C rm t t i  t  .J  o a g, h o
1 9 ;5 :2 9 15 3 2 3

3?。?tP MarP Maea  t  C r aorpi, P t , ui  nr E?。?h m t ah e a  , e l . o g a 18;791)59 992 (/0 :0 4  al A Si e O, i B  a.J?。颍?t r H s r  thr  Me r  t  C o a g , e , c e e l h o
1 9 ;0 2 6 9 0 5 8: 3

5  al A thr  Me r  t  C rm tg, H s r  i e O, i B  a.J  o a r e ,Sc e e l h o
1 9 ;0 4 9 2 6 5: 1

6  n  e T  Sh ee H  Rat T  a.J  r- Va B k  A, cern?。?, ni e l C o e o  t  h

36 样品测定 . 采用测量峰面积 外标一点法 , 种水 解甙元均 3 以槲皮素为对照 , 计算样 品水解后各甙元含量。 按文 献〔〕 5的换算关系计算银杏总黄酮 含量 , 测得 4 批样

maor 1 9 ;4 :7 tg , 9 1 53 3 5

7 戴伦凯著 , 谢玉如 等译. 黄酮类化合物. 北京: 科学 出版 社 ,935 18 :2

A a s ad?。?m nt n  te  vni fo Gn g nl i n D e ia o o h Faoo s  m  ko y s  e r i f  l d r i
Blb E t c b Hi P roma c Lq i C rm tga h i a  r t  g efr ne  ud  o ao rp y o x a y  h  i h
Xe?。?n  G o?。幔纾?iD i ad  Z ou aa n u h
(h N tnl  i n Cn e?。茫?c P am c oy T e  i a Ta i et o l i l  r ao g , ao r n g  r f  n a h l Hua Mei l  v sy C agh , 108 nn?。洌?U i r t, hns 407) a n ei a Q atav rvr d hs h h  f m ne  icrm t r h m t d  be dvl e fr  unite  e e- a i pr r ac lu ho a ga i e o hs  n  e pd  te t i e s p e  e o g i d  q o p c  h a e e o o h s aao ad  e i t n?。簦濉?oo s?。?ite?。颍?o te  e og ko  b L E b. e rtn  dt mn i o h fvni f d  h et t f  l vs  i g boa  G ) p i n e r a o f  l a d o n  x a s  h e u a f  n i l .( Poeu i l e hdo s o t fvni ad  s un qatav crm tg p ias o te  r dr n u s  r yi f  l oo s  sbe et  nit e?。?a r h s y  h o- c e  d y l s  h a c e  d n u q u ti h o a c?。?f  b t nd?。铮?o a  cl n  h?。簦幔?04 otoh shr ai (5 4)?。?et T e?。?a e al ns  C8  m wt m hnl .%  hpop oc?。洹?: 5 a l n.  dt - i gc n  1 o u i e - r i c 5 s  u h ec

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